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皮膚反應(yīng)(致敏)試驗(yàn)儀
  • 更新日期:2025-04-27     瀏覽次數(shù):65
    • 皮膚反應(yīng)(致敏)試驗(yàn)儀

      一、 儀器介紹

      實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>

      確定重復(fù)接觸受試物對哺乳動(dòng)物是否可引起皮膚反應(yīng)及其程度

      試驗(yàn)概述:  

      局部封閉涂皮試驗(yàn)(Buehler test,BT)和豚鼠最大值試驗(yàn)(uinea pig maximisation test,GPMT)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過多次皮膚涂抹(誘導(dǎo)接觸)或皮內(nèi)注射受試物10d~14d(誘導(dǎo)階段)后,給予激發(fā)劑量的受試物,觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,并與對照動(dòng)物比較對激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度。

      小鼠局部淋巴結(jié)分析試驗(yàn)(locallymph node assayLLNA)是通過耳部給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物受試物,引起淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞增生,淋巴細(xì)胞增生與受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標(biāo)記方法,測定試驗(yàn)組與對照組淋巴細(xì)胞的標(biāo)記率,并進(jìn)行對比,獲得刺激指數(shù),評價(jià)致敏強(qiáng)度。應(yīng)用范圍

      應(yīng)用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個(gè)領(lǐng)域

      符合標(biāo)準(zhǔn):

      GB/T 15670.9-2017《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗(yàn)方法第9部分皮膚反應(yīng)(致敏)試驗(yàn)》

      二、試驗(yàn)步驟:

      1. Buehler TestBT 

      動(dòng)物模型:豚鼠

      操作步驟:

      誘導(dǎo)階段:通過封閉式皮膚涂抹受試物,持續(xù)10-14天。激發(fā)階段:間隔后再次涂抹受試物,觀察皮膚反應(yīng)。

      觀察指標(biāo):紅斑、水腫等皮膚炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度(主觀評分)

      優(yōu)點(diǎn):

      模擬人類皮膚接觸途徑,適用于局部制劑(如化妝品、外用藥物)

      無需注射,操作相對溫和。0

      缺點(diǎn):

      敏感性較低,可能漏檢弱致敏物,。依賴主觀評分,存在實(shí)驗(yàn)者偏差。0應(yīng)用場景:傳統(tǒng)化妝品、外用藥品的安全性評估。

       

      2.豚鼠最大值試驗(yàn)(GPMT

      動(dòng)物模型:豚鼠

      操作步驟:

      誘導(dǎo)階段:皮內(nèi)注射受試物(常聯(lián)合弗氏佐劑)結(jié)合皮膚涂抹,持續(xù)10-14天。

      激發(fā)階段:再次涂抹受試物,評估皮膚反應(yīng)。

      觀察指標(biāo):BT類似,但反應(yīng)更強(qiáng)烈(紅斑、水腫、硬結(jié))

      優(yōu)點(diǎn):

      敏感性高,可檢測強(qiáng)致敏物和弱致敏物;

      國際的“金標(biāo)準(zhǔn)",尤其適用于化學(xué)品和工業(yè)原料。

      缺點(diǎn):

      使用佐劑可能引發(fā)過度免疫反應(yīng),導(dǎo)致假陽性;

      動(dòng)物痛苦程度較高,倫理爭議較大。

      應(yīng)用場景:工業(yè)化學(xué)品、強(qiáng)致敏性物質(zhì)(如染發(fā)劑、橡膠添加劑)的嚴(yán)格檢測。

       

      3.小鼠局部淋巴結(jié)試驗(yàn)(LLNA

      動(dòng)物模型:小鼠.

      操作步驟:

      誘導(dǎo)階段:連續(xù)3天耳部涂抹受試物。

      檢測指標(biāo):通過3H-胸苷或BrdU標(biāo)記增殖的淋巴細(xì)胞,計(jì)算刺激指數(shù)(SI)觀察指標(biāo):淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞增殖程度(SI>3判為陽性)

      優(yōu)點(diǎn):

      客觀定量:減少主觀評分誤差;

      符合3R原則:動(dòng)物用量少,無需激發(fā)階段,痛苦小;

      高效快速:試驗(yàn)周期短(1)。

      缺點(diǎn):

      對某些物質(zhì)(如金屬鹽)敏感性不足,需使用放射性物質(zhì)或特殊設(shè)備,成本較高。

      應(yīng)用場景:歐盟等法規(guī)優(yōu)先推薦的替代方法,廣泛用于藥品、化妝品及化工產(chǎn)品的初篩。

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